落樱芳满庭，樱落满庭芳

关于REAL-TIME引物设计和探针选择， 附有三种常用探针的介绍网址，希望对大家有用

1.The design step: the selection of PCR primers and probes

2.Choice of detection method (SYBR Green or a fluoresent nucleic acid probe) for the real time PCR.
Generally, real time PCR with SYBR green is used to optimize primers and is principally used to detect PCR products in a research setting. TaqMan probes and molecular

本人刚刚做过～参考部分文献，自己摸的条件

引物篇（引物合成及各种问题总结）
1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。
DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。
2.引物长度一般在15~30碱基之间。
引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。
3.引物GC含量在40%~60%之间，Tm值最好接近72℃。
GC含量（composition）过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。另外，上下游引物的Tm值（melting temperature）是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双

水：

昭贵的芦荟水 我买的是小瓶的试用装。论坛上简直说成了万能水。不过我感觉好像没有那么好。吸收确实相当快，简直是一到脸上就渗进去了，但是进去之后就仿佛消失得无影无踪。据说是要长久使用才能看出效果，或许是这样吧。

千纤草的丝瓜水 500ML20米，用到审美疲劳。感觉好像比较稀，用来泡膜还可以。

田缘舞沙的玫瑰水 香气浓郁，用起来很舒服。吸收也还可以。

乳液：

 大宝的SOD蜜 地球人都知道的产品，确实还不错。吸收和滋润度都可以，持久性也不错。

百雀羚的止痒润肤露 很好用，没有大宝的那么香，推荐。

今天这个日子太值得纪念了！敬爱的老张同志居然在百忙之中，于两天前回了我的邮件！而我由于在实验室打不开邮箱，直到今天才发现！原文粘帖如下，已做纪念！

Tahnk you for your email. I am glad that you are starting the experiments in the lab. My promiary goal is to set you in a Cx31 group. It is an excitingh project. You are right. We do not know whether this chennels function as their wildtype couterpart. Nevertheless, it will not so easy to deal with your question.